Siete años más tarde volvió y desembarcó en sus costas, pero murió a causa del ataque de los indígenas.

La colonización realmente comenzó con Sebastián Gaboto que en el año 1527 fundó un fuerte llamado Santi-Spíritu en la confluencia de los rios Paraná con el Carcaraña.

Gaboto junto con Pedro de Mendoza fundan la ciudad de Buenos Aires en el año 1536, pero poco después es incendiada y destruida por los indios Querandíes.

La exploración y conquista fue llevada a término por varios exploradores como Juan de Ayolas, Alvar Núñez Cabeza de Vaca, Martinez de Irala, Ortíz de Zárate, etc.

Juan de Garay refundó la ciudad de Buenos Aires en 1580.